ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱。近二十幾年來，免疫學分析方法發(fā)展很快，特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后，使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光（IFA）和60年代的放射免疫（RIA）分析技術之后，1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發(fā)展成液體標本中微量物質(zhì)的測定方法，建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術，是一種用酶標記抗原或抗體的方法。由于酶的生物催化作用，一個酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應，產(chǎn)生了放大作用，使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識別出來。
ELISA試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。將抗原、抗體免疫反應的特異性和酶的催化作用原理有機地結合起來，可敏感地檢測體液中微量的特異性抗體或抗原。此項技術自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。
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ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。7 b, u8 G: Q（ f. e# s
ELISA基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記，基本原理有三條：1 q" g9 ?* z: j a4 ^" x# a
（1） 抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；
（2） 抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；
（3） 酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。2 t1 d1 s0 I4 H- t* A
由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。. L2 x4 _- g6 f0 k
在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開，zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，故可根據(jù)顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA基本原理
點擊次數(shù)：1519 更新時間：2011-04-27
